在生物医学研究中,产品特性Matrigel基质的色差变化(由淡黄色到深红色)主要是由于酚红和碳酸氢盐与二氧化碳的相互作用所引起的。然而,当与5% CO2保持平衡后,这种色差会显著减少。为了确保Matrigel均匀分散,在冻融后应轻轻摇晃试剂瓶。所有操作需在无菌环境中进行,试剂瓶的瓶盖也需用70%乙醇清洁并自然干燥。同时,为保证Matrigel呈现匀浆状,建议使用预冷的移液器。
细胞能够在0.5mm厚度的Matrigel基质表面生长,也能在1mm厚度的三维基质中进行生长。但需注意,过度稀释的Matrigel会导致形成非胶质的蛋白层,虽然可以用于细胞贴壁,但不适合细胞分化研究。重要提示:冻融后的Matrigel应分装在多个小管中,每个小管都需使用预冷的冻存管,迅速冷冻并保存,避免多次冻融。
Matrigel在22-35°C环境下迅速成胶,因此在解冻时建议在4°C冰箱中过夜,以防在随着温度升高的过程中局部成胶。所有实验用具在使用前应进行冰浴处理,并确保使用预冷的移液管、吸头及小管进行Matrigel的操作。成胶后的Matrigel可在24-48小时后重新呈现液态。
为了保证Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性,稀释浓度不应低于1:3,且可使用无血清培养基进行稀释,Matrigel成胶后应立即使用。
薄胶成胶方法
1. 冻融Matrigel后,使用预冷的移液枪头将基质混匀至均浆状。
2. 将需要使用的培养板置于冰上,加入浓度为50μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37°C下放置30分钟,即可使用。
厚胶成胶方法
1. 同样在冻融后,使用预冷的移液枪头将Matrigel基质混匀。
2. 将培养的细胞与Matrigel基质混合,并在冰浴中操作,确保细胞悬浮于基质中,按150-200μL/cm²生长面积的比例添加Matrigel。
3. 在37°C放置30分钟,即可成胶。可以将细胞培养的基质直接添加,或使细胞在胶表面上生长。
薄层包被方法
1. 冻融后,使用预冷的移液枪头将Matrigel基质混匀。
2. 根据需要,采用无血清培养基稀释Matrigel基质,并确定最佳包被浓度。
3. 将稀释后的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中,包被量需至少覆盖整个器皿的生长表面,并在室温下孵育1小时。
对于生物医学领域的研究,尊龙凯时提供可靠的Matrigel产品,助力各类细胞培养实验的成功。我们致力于为您的研究提供最优质的材料,确保您在细胞生物学和组织工程等领域取得突破性的进展。