尊龙凯时致力于肿瘤生物医学研究，探索癌症细胞在代谢重编程中的生存适应机制，以期为新疗法的开发提供支持。本文结合细胞水平代谢通量分析与分子水平代谢组学/脂质组学技术，深入探讨了两种酪氨酸激酶抑制剂（AG-879和SU1498）对白血病细胞（THP-1）代谢的调控机制。

方法与技术

在细胞代谢分析中，采用Seahorse XF Pro实时监测细胞的线粒体呼吸（OCR）和糖酵解（ECAR），评估ATP生成速率、质子泄漏（Proton Leak）和线粒体备用呼吸能力（SRC）。

药物处理方面，AG-879和SU1498分别处理THP-1细胞2小时和18小时，以观察急性与长期的代谢效应。

在分子代谢分析中，采用Bravo自动化平台进行代谢物与脂质的双相提取，结合极性代谢物的HILIC和脂质的反相色谱分离。同时，利用Agilent Revident系统进行非靶向代谢组学和脂质组学分析，并辅以MassHunter软件进行数据解析与注释。

特别提示：细胞数目的归一化至关重要，使用NovoCyte Quanteon搭配自动上样器Q，确保后续细胞与分子代谢分析的实验可信度。

关键发现

线粒体功能与代谢适应

AG-879处理导致线粒体解偶联，质子泄漏随时间增加，并完全丧失SRC，表明细胞的适应能力受到限制。而SU1498在短期内显著增加质子泄漏，但长期则下降，同时降低SRC，表明细胞通过下调TCA循环应对代谢压力。两种药物均抑制了线粒体ATP生成，迫使细胞转而依赖糖酵解进行能量补偿。

代谢组学与脂质组学结果

SU1498显著改变了多种代谢物，减少了糖酵解中间体（如磷酸戊糖途径中的代谢物），与GlycoATP升高相一致。此外，嘌呤代谢物的增加（如尿苷、肌苷）提示了代谢重编程可支持核酸合成。同时，脂质组学显示甘油三酯（TG）显著积累，可能通过回补反应将乙酰辅酶A转化为脂质储存能量。而多不饱和脂肪酸（PUFA）相关的磷脂酰肌醇（PI）增加，可能对癌细胞的信号通路产生影响。相比之下，AG-879的影响相对较弱，仅有少数代谢物和脂质显著变化，可能与SRC的完全丧失有关。

结论

结合细胞功能与分子组学数据，我们揭示了单一技术无法发现的代谢适应机制，例如SU1498通过TG积累和PUFA-PI重塑应对代谢压力。线粒体解偶联与脂代谢重编程可能成为癌细胞耐药的新靶点，为联合疗法的开发提供了思路。

该研究工作流程为药物代谢机制的探索提供了标准化方案，适用于抗癌药物筛选、毒性评估及个性化医疗中的代谢标志物发现。要了解更多详细信息，请访问尊龙凯时的官方网站。