中文

English

病理染色实验注意事项 - 尊龙凯时生物医疗指南

发布时间:2025-03-27   信息来源:尊龙凯时官方编辑

病理学技术是医疗诊断的基石,其发展直接影响到病理诊断学的进步。早期的诊断主要依赖于形态学、组织学或生化学的分析。病理学作为一门研究疾病发生与发展规律的学科,重点关注在疾病过程中组织和细胞的代谢、功能及结构的变化。

病理染色实验注意事项 - 尊龙凯时生物医疗指南

在染色实验中,前期的组织处理对最终染色效果至关重要,处理注意事项涉及多个步骤,包括取材、固定、脱水、透明、浸润、包埋、切片及染色等。

1. 组织取材与固定

1. 取材时应选择新鲜、适中大小的组织块,避免挤压变形,尽量保持组织的原有形态与清洁。理想的组织块尺寸应小而薄,一般不超过2×15×0.3cm。
2. 固定是关键步骤,通常使用10%甲醛溶液或其他固定液(如Carnoy固定液),固定时间根据组织块大小确定,一般不宜超过24小时,以防组织自溶或腐败。
3. 固定液的选择对后续的染色效果有重要影响,例如,Bouin's固定液适用于染色效果良好的组织。

2. 组织固定的目的

组织固定的主要目的是:
1. 立即破坏细胞内的溶酶体酶,防止自溶。
2. 杀灭外来细菌,避免组织腐败。
3. 尽量保持细胞活体时的原状。
4. 凝固并沉淀细胞内的各类产物,保留其不溶性。
5. 维持组织的硬度与弹性,避免在后续处理过程中的扭曲。
6. 有助于区分不同细胞的折光率,提高细胞识别的准确性。
7. 为组织分析性染色提供媒染作用,提高染色效果。
8. 保存细胞内抗原性,有助于免疫组化染色中的抗原抗体结合反应。

3. 固定的注意事项

1. 固定应及时进行,组织离体后需在1小时内固定。
2. 固定液的选择应符合制作要求。
3. 固定液用量需大于组织体积的4-10倍。
4. 固定液浓度需准确,浓度过稀或过浓均可影响固定效果。
5. 固定温度应保持在室温或35-37℃,避免高温致使组织自溶及细胞抗原损坏。
6. 固定时间需合理安排,新鲜标本应剖开并固定12-24小时,大标本在室温下再固定4-6小时,小标本需再固定3-4小时。若室温低,应延长固定时间,但总时间不超过48小时。
7. 对于需要进行分子病理分析的标本,总固定时间不应超过24小时,同时不得少于6小时。

4. Bouin's固定液概述

尊龙凯时提供的Bouin's固定液(产品编号:BL-G016),主要成分为PA、甲醛及乙酸,适用于细胞和组织的固定。Bouin's固定液常用于细胞和组织的后续染色、观察和分析,广泛应用于免疫组化、染色和病理学研究等。该固定液在研究鸡法氏囊的显微结构时,能够有效固定组织并进行光学观察。此外,Bouin's固定液还是整体染色法中的重要工具,能够有效节省人力与物力。